大鼠脊髓損傷模型
1.背景介紹
脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)可導致機體運動功能和感覺功能喪失,甚至造成死亡,對患者造成極大危害。脊髓損傷模型可以通過多種方法建立,包括挫傷、擠壓傷、牽拉與脫位、橫斷、缺血、光化學、興奮性毒性和電解傷模型。建立穩(wěn)定的大鼠脊髓損傷模型是為了提供標準的疾病模型,以評估新治療措施的有效性。
2.實驗材料和方法
01 實驗材料
SD大鼠(雄性,180-220g)
異氟烷(廠家:瑞沃德 型號:R510-22-10)
動物呼吸機(廠家:上海奧爾科特生物 型號:ALC-V8S)
通用型小動物麻醉機(廠家:瑞沃德 型號:R580S)
02 造模方法
1、適應(yīng)性喂養(yǎng)7天,麻醉大鼠。
2、在背部脊髓兩側(cè)觸摸大鼠最下肋與軟組織分界處作為骨定位標志,術(shù)區(qū)消毒,選擇 T10 為中心,作一2.5cm正中切口,充分暴露 T9至 T11節(jié)段,利用咬骨鉗將T10棘突和椎板去除,注意硬膜完整。用打擊器擊打T10,若損傷后局部迅速充血水腫,且雙后肢抽搐,尾巴擺動,則為造模成功。
3、術(shù)后4周取材脊髓組織。
03 評價指標
尼氏染色,HE染色
3.驗證
尼氏染色
(左:正常組;右:模型組)
尼氏染色結(jié)果:正常組脊髓神經(jīng)元尼氏體清晰可見,核大而圓,細胞質(zhì)內(nèi)有明顯的斑塊狀尼氏體。模型組尼氏體數(shù)量減少,明顯變淺,部分視野核固縮,尼氏體模糊不清,神經(jīng)元間隙增大。
HE染色
(左:正常組;右:模型組)
HE染色結(jié)果:正常組脊髓結(jié)構(gòu)基本完整,神經(jīng)細胞分布均勻、形態(tài)正常,尼氏體清晰。模型組組織出血嚴重,有大片出血灶,組織中存在大量血細胞;灰白質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞、撕裂,部分神經(jīng)纖維溶解、消失;組織疏松水腫,空泡變性,尼氏體減少、淺染。