碘乙酸鈉誘導(dǎo)骨關(guān)節(jié)炎模型
1.背景介紹
骨關(guān)節(jié)炎是一種常見的關(guān)節(jié)疾病,主要特征是關(guān)節(jié)軟骨的退化、骨下結(jié)構(gòu)的變化以及周圍軟組織的病理改變。它通常伴隨疼痛、腫脹和功能障礙。由于其復(fù)雜的病理生理機(jī)制,研究人員需要建立合適的動(dòng)物模型來模擬人類的疾病狀態(tài)。
碘乙酸鈉(MIA,Monosodium Iodoacetate)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法,用于誘導(dǎo)動(dòng)物模型中的骨關(guān)節(jié)炎(OA)。通過影響軟骨細(xì)胞和關(guān)節(jié)組織的代謝來誘導(dǎo)骨關(guān)節(jié)炎。當(dāng)注射到關(guān)節(jié)腔內(nèi)時(shí),MIA會引起關(guān)節(jié)腔內(nèi)的急性炎癥反應(yīng),導(dǎo)致軟骨細(xì)胞的凋亡和軟骨基質(zhì)的降解。這種變化與人類骨關(guān)節(jié)炎的病理特征相似,使其成為一種理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?
2.實(shí)驗(yàn)材料和方法
01 實(shí)驗(yàn)材料
• SD大鼠(雄性,180-220g)
• 異氟烷(廠家:瑞沃德 型號:R510-22-10)
• 動(dòng)物呼吸機(jī)(廠家:上海奧爾科特生物 型號:ALC-V8S)
• 通用型小動(dòng)物麻醉機(jī)(廠家:瑞沃德 型號:R580S)
02 造模方法
1、適應(yīng)性喂養(yǎng)7天,動(dòng)物麻醉機(jī)混合純氧進(jìn)行麻醉。
2、麻醉后,仰臥位固定,右側(cè)膝關(guān)節(jié)備皮,手術(shù)范圍常規(guī)消毒。使用1mL注射器穿刺老鼠膝關(guān)節(jié)髕韌帶注入關(guān)節(jié)腔中,注射50μL配好的碘乙酸鈉溶液(40mg/mL,現(xiàn)配現(xiàn)用)構(gòu)建大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型。造模4周后取材膝關(guān)節(jié)組織。
03 評價(jià)指標(biāo)
影像學(xué)檢查(CT),血清ELISA檢測,番紅固綠染色,HE染色
3.驗(yàn)證
影像學(xué)檢查(CT)
(左:正常組;右:模型組)
CT檢測膝關(guān)節(jié)損傷情況:正常組關(guān)節(jié)無損傷,骨骼表面平滑。模型組骨骼表面不平整,扭曲變形,骨骼損傷嚴(yán)重。
血清ELISA檢測
番紅固綠染色
(左:正常組;右:模型組)
番紅固綠染色結(jié)果:正常組軟骨基質(zhì)紅染均勻,潮線清晰,軟骨下骨皮質(zhì)、骨小梁呈綠色,層次清楚。模型組軟骨損傷基質(zhì)不著色或者很淺,紅染范圍小,綠色范圍增大;關(guān)節(jié)軟骨表面粗糙、缺損,結(jié)構(gòu)雜亂、潮線模糊不清。
HE染色
(左:正常組;右:模型組)
HE染色結(jié)果:正常組關(guān)節(jié)軟骨表面光滑平整、結(jié)構(gòu)清晰。模型組軟骨結(jié)構(gòu)紊亂,表層出現(xiàn)纖維化變性及缺損,軟骨表面粗糙、完整性破壞,潮線不規(guī)則或消失中斷;軟骨下骨密質(zhì)層部分區(qū)域變薄,骨松質(zhì)層骨小梁相對稀疏。