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1.背景介紹
骨關節(jié)炎是一種常見的關節(jié)疾病,主要特征是關節(jié)軟骨的退化、骨下結構的變化以及周圍軟組織的病理改變。它通常伴隨疼痛、腫脹和功能障礙。由于其復雜的病理生理機制,研究人員需要建立合適的動物模型來模擬人類的疾病狀態(tài)。
碘乙酸鈉(MIA,Monosodium Iodoacetate)是一種常用的實驗方法,用于誘導動物模型中的骨關節(jié)炎(OA)。通過影響軟骨細胞和關節(jié)組織的代謝來誘導骨關節(jié)炎。當注射到關節(jié)腔內時,MIA會引起關節(jié)腔內的急性炎癥反應,導致軟骨細胞的凋亡和軟骨基質的降解。這種變化與人類骨關節(jié)炎的病理特征相似,使其成為一種理想的實驗模型。
2.實驗材料和方法
01 實驗材料
• SD大鼠(雄性,180-220g)
• 異氟烷(廠家:瑞沃德 型號:R510-22-10)
• 動物呼吸機(廠家:上海奧爾科特生物 型號:ALC-V8S)
• 通用型小動物麻醉機(廠家:瑞沃德 型號:R580S)
02 造模方法
1、適應性喂養(yǎng)7天,動物麻醉機混合純氧進行麻醉。
2、麻醉后,仰臥位固定,右側膝關節(jié)備皮,手術范圍常規(guī)消毒。使用1mL注射器穿刺老鼠膝關節(jié)髕韌帶注入關節(jié)腔中,注射50μL配好的碘乙酸鈉溶液(40mg/mL,現配現用)構建大鼠膝骨關節(jié)炎模型。造模4周后取材膝關節(jié)組織。
03 評價指標
影像學檢查(CT),血清ELISA檢測,番紅固綠染色,HE染色
3.驗證
影像學檢查(CT)
(左:正常組;右:模型組)
CT檢測膝關節(jié)損傷情況:正常組關節(jié)無損傷,骨骼表面平滑。模型組骨骼表面不平整,扭曲變形,骨骼損傷嚴重。
血清ELISA檢測
番紅固綠染色
(左:正常組;右:模型組)
番紅固綠染色結果:正常組軟骨基質紅染均勻,潮線清晰,軟骨下骨皮質、骨小梁呈綠色,層次清楚。模型組軟骨損傷基質不著色或者很淺,紅染范圍小,綠色范圍增大;關節(jié)軟骨表面粗糙、缺損,結構雜亂、潮線模糊不清。
HE染色
(左:正常組;右:模型組)
HE染色結果:正常組關節(jié)軟骨表面光滑平整、結構清晰。模型組軟骨結構紊亂,表層出現纖維化變性及缺損,軟骨表面粗糙、完整性破壞,潮線不規(guī)則或消失中斷;軟骨下骨密質層部分區(qū)域變薄,骨松質層骨小梁相對稀疏。