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技術(shù)專(zhuān)欄
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大鼠脊髓損傷模型
供稿：恒意賽
發(fā)布時(shí)間：2024-11-11
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1.背景介紹
脊髓損傷（spinal cord injury,SCI）可導(dǎo)致機(jī)體運(yùn)動(dòng)功能和感覺(jué)功能喪失，甚至造成死亡，對(duì)患者造成極大危害。脊髓損傷模型可以通過(guò)多種方法建立，包括挫傷、擠壓傷、牽拉與脫位、橫斷、缺血、光化學(xué)、興奮性毒性和電解傷模型。建立穩(wěn)定的大鼠脊髓損傷模型是為了提供標(biāo)準(zhǔn)的疾病模型，以評(píng)估新治療措施的有效性。
2.實(shí)驗(yàn)材料和方法
01 實(shí)驗(yàn)材料
SD大鼠（雄性，180-220g）
異氟烷（廠家：瑞沃德 型號(hào)：R510-22-10）
動(dòng)物呼吸機(jī)（廠家：上海奧爾科特生物 型號(hào)：ALC-V8S）
通用型小動(dòng)物麻醉機(jī)（廠家：瑞沃德 型號(hào)：R580S）
02 造模方法
1、適應(yīng)性喂養(yǎng)7天，麻醉大鼠。
2、在背部脊髓兩側(cè)觸摸大鼠最下肋與軟組織分界處作為骨定位標(biāo)志，術(shù)區(qū)消毒，選擇 T10 為中心，作一2.5cm正中切口，充分暴露 T9至 T11節(jié)段，利用咬骨鉗將T10棘突和椎板去除，注意硬膜完整。用打擊器擊打T10，若損傷后局部迅速充血水腫，且雙后肢抽搐，尾巴擺動(dòng)，則為造模成功。
3、術(shù)后4周取材脊髓組織。
03 評(píng)價(jià)指標(biāo)
尼氏染色，HE染色
3.驗(yàn)證
尼氏染色
（左：正常組；右：模型組）
尼氏染色結(jié)果：正常組脊髓神經(jīng)元尼氏體清晰可見(jiàn)，核大而圓，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有明顯的斑塊狀尼氏體。模型組尼氏體數(shù)量減少，明顯變淺，部分視野核固縮，尼氏體模糊不清，神經(jīng)元間隙增大。
HE染色
（左：正常組；右：模型組）
HE染色結(jié)果：正常組脊髓結(jié)構(gòu)基本完整，神經(jīng)細(xì)胞分布均勻、形態(tài)正常，尼氏體清晰。模型組組織出血嚴(yán)重，有大片出血灶，組織中存在大量血細(xì)胞；灰白質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞、撕裂，部分神經(jīng)纖維溶解、消失；組織疏松水腫，空泡變性，尼氏體減少、淺染。
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