背景介紹

心力衰竭（HF）是由于心臟結(jié)構(gòu)或功能性疾病導(dǎo)致心室充盈或射血能力受損的一組復(fù)雜臨床綜合征，其發(fā)病率和病死率逐年增高，嚴(yán)重危害人類身體健康。其主要臨床表現(xiàn)為呼吸困難、乏力，以及肺瘀血和外周水腫。心力衰竭的發(fā)病機(jī)制和干預(yù)治療的研究還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床要求，這就需要建立成熟穩(wěn)定的心力衰竭動(dòng)物模型來(lái)了解疾病進(jìn)程以及研究新的治療方法。

 

實(shí)驗(yàn)材料和方法

01 實(shí)驗(yàn)材料：

• SD大鼠（雄性，180-220g）
• 異氟烷（廠家：瑞沃德 型號(hào)：R510-22-10）
• 動(dòng)物呼吸機(jī)（廠家：上海奧爾科特生物 型號(hào)：ALC-V8S）
• 通用型小動(dòng)物麻醉機(jī)（廠家：瑞沃德 型號(hào)：R580S）

 

02 造模方法：

1. 適應(yīng)性喂養(yǎng)7天，運(yùn)用異氟烷和脂肪乳混合做成乳化異氟烷的方式，腹腔注射麻醉大鼠。
2. 頸部剪開(kāi)，鈍性分離出氣管，經(jīng)口插管，連接呼吸機(jī)，用先調(diào)整好的參數(shù)（大鼠呼吸頻率80，吸呼比1：1，潮氣量6.4） 鈍性分離胸腔左側(cè)肌肉，暴露肋間，從第3肋和第4肋間撕開(kāi)肌肉，暴露心臟，輕輕撕開(kāi)一點(diǎn)心包膜，用6-0帶線縫合針于左心耳與動(dòng)脈圓錐之間進(jìn)針，心電圖ST抬高表示結(jié)扎成功，之后縫合好肋間肌肉和胸腔肌肉，過(guò)5-10分鐘撤掉呼吸機(jī)，待老鼠恢復(fù)自主呼吸，放置于籠內(nèi)。
3. 造模完成之后4-8w取材心臟組織。

 

03 評(píng)價(jià)指標(biāo)：

血清指標(biāo)ELISA檢測(cè)，Masson染色，HE染色

 

驗(yàn)證

血清指標(biāo)ELISA檢

Masson染色

  

（左：正常組；右：模型組）

Masson染色結(jié)果：正常組大鼠心肌組織基本呈紅色，無(wú)明顯藍(lán)色膠原纖維化組織。模型組心肌纖維化較嚴(yán)重，大量膠原纖維增生，可見(jiàn)大片藍(lán)色心肌膠原沉積于心肌細(xì)胞及血管周圍。心肌細(xì)胞肥大，胞質(zhì)腫脹，排列紊亂。

HE染色

  

（左：正常組；右：模型組）

HE染色結(jié)果：正常組大鼠心肌纖維排列整齊有序，心肌細(xì)胞形態(tài)正常、輪廓清晰。模型組心肌細(xì)胞間隙明顯增寬，有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)毛細(xì)血管擴(kuò)張?jiān)錾?。?xì)胞腫脹，邊界模糊不清，心肌細(xì)胞損傷嚴(yán)重，呈小灶狀或片狀壞死。