【背景介紹】

腎缺血再灌注是一種用于模擬腎臟在缺血狀態(tài)下再恢復血流情況的實驗模型，這在醫(yī)學研究中對于理解腎臟損傷和修復機制非常重要。這種模型通常使用微型動脈夾來夾閉小鼠的雙側(cè)腎動脈來制備，可以觀察到腎功能和腎臟病理變化。

 

【實驗材料和方法】

01 實驗材料：

C57小鼠（雄性，6-8周）

異氟烷（廠家：瑞沃德 貨號：R510-22-10）

通用型小動物麻醉機（廠家：瑞沃德 型號：R580S）

 

02 造模方法：

1、適應性喂養(yǎng)7天，小動物麻醉機混合純氧進行麻醉。

2、腹側(cè)皮膚剪開，暴露腎臟，直視下清晰顯露一側(cè)腎蒂，游離出一側(cè)腎動脈，觀察老鼠呼吸狀態(tài)，缺血期密切觀察腎臟顏色，,觀察腎臟顏色由鮮紅色變?yōu)榘导t色，結(jié)扎45min后松開線結(jié)，再灌注后，逐層縫合關(guān)腹。術(shù)后觀察小鼠狀態(tài)至小鼠蘇醒，再灌注后24h取材腎臟組織。

 

03 評價指標：

腎臟缺血圖片，血清生化檢測，HE染色，Tunel（熒光）檢測

 

【驗證】

腎臟缺血圖片

 

血清生化檢測

HE染色

  

（左：正常組；右：模型組）

HE染色結(jié)果：與正常組相比，模型組組織結(jié)構(gòu)異常，腎間質(zhì)可見炎細胞浸潤。大量腎小管上皮細胞腫脹破裂，胞核消失，嚴重部位，細胞片狀壞死、脫落。部分腎小管擴張，管腔內(nèi)大量脫落的上皮細胞碎片呈管型。

 

Tunel（熒光）檢測

  

（左：正常組；右：模型組）

Tunel結(jié)果：DAPI以藍光表示，Tunel(+)以綠光表示。與正常組相比，模型組大量腎小管上皮細胞有明顯的細胞凋亡現(xiàn)象。