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【背景介紹】
膿毒癥是指因感染引起的反應(yīng)失調(diào)導(dǎo)致的危及生命的器官功能障礙,可累及多個臟器,導(dǎo)致臟器官功能損害或衰竭。膿毒癥已成為常見的多發(fā)危重疾病,對人類健康構(gòu)成了巨大威脅。動物疾病模型的建立有助于人們更好地探討膿毒癥的發(fā)病機制和尋找有效的治療措施。
膿毒癥造模的方法主要有3種,包括大腸桿菌感染型、脂多糖誘導(dǎo)型、盲腸結(jié)扎型。最廣泛使用的膿毒癥模型是盲腸結(jié)扎模型,該模型被認(rèn)為與人類膿毒癥具有顯著相容性。盲腸結(jié)扎模型的主要優(yōu)點是腹膜通過與失活組織結(jié)合而接種了來自動物本身的混合微生物菌群。在盲腸結(jié)扎后,會產(chǎn)生類似于人類敗血癥的免疫、血流動力學(xué)和生化反應(yīng)。
【造模方法及驗證】
1. 實驗材料和方法
*實驗材料:SD大鼠(雄性,6-8周)
*造模方法:
1. 以10%水合氯醛(300mg/kg)對大鼠腹腔麻醉后腹腔注射麻醉大鼠,麻醉滿意后大鼠無翻正反射,以碘伏常規(guī)消毒腹部區(qū)域,鋪無菌洞巾。
2. 沿腹正中線作一長約1cm縱行切口,用無菌鑷探查并拖出暴露盲腸。
3. 在距盲腸盲端2cm處用無菌4號絲線結(jié)扎盲腸,用20G套管針將盲腸盲端貫通穿孔2次,避免損傷腸系膜及盲腸血管。
4. 擠出少許糞便后回納腹腔,逐層縫合腹壁切口。
5. 造模至少24h后取各組大鼠肝、腎組織,HE染色觀察病理變化。
*評價指標(biāo):動物行為學(xué)描述,HE染色。
2. 驗證
*動物行為學(xué)描述
與正常組大鼠相比,模型組大鼠毛發(fā)臟、亂、無光澤,嘴和眼角會出現(xiàn)膿性分泌物,厭食、反應(yīng)遲鈍,體溫低等現(xiàn)象。
*HE染色(肝)
*HE染色結(jié)果:與假手術(shù)組相比,模型組肝組織結(jié)構(gòu)異常,有典型的脂肪變性空泡。
*HE染色(腎)
*HE染色結(jié)果:與假手術(shù)組相比,模型組腎組織結(jié)構(gòu)異常,腎小球皺縮,腎小管損傷,有炎癥細(xì)胞浸潤。